معلومة

دور Fbx15 في الخلايا الجذعية الجنينية واستخدامه في فحص خلايا iPS (ورق Yamanaka وغيرها)؟


أحاول فهم اختبار الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات في ورقة تاكاهاشي وياماناكا 2006.

قاموا بإدخال شريط بيتا-جيو ، والذي يحتوي على جين مقاومة النيوميسين ، في اف بي اكس 15 الجين. الفكرة هي أنه سيتم التعبير عن شريط بيتا الجغرافي عندما اف بي اكس 15 سيتم التعبير عنها ، وبالتالي منح مقاومة G418 لتلك الخلايا المعبر عنها فقط اف بي اكس 15.

يقولون أنه "على الرغم من التعبير عنه بشكل خاص في خلايا الفئران الجذعية الجنينية والأجنة المبكرة ، إلا أن Fbx15 يمكن الاستغناء عنه للحفاظ على القدرات المتعددة وتطور الفئران." هل هذا يعني ذلك اف بي اكس 15 سيتم التعبير عنها في الخلايا الجذعية المستحثة ، ولن يتم التعبير عنها عند التمايز؟ (ما الذي يميز Fbx15 عن الخلايا الجذعية المحفزة للخلايا الجسدية ، بما في ذلك تلك التي قد تكون مشتقة من الخلايا الجذعية المحفزة ، كما هو الحال عندما لا يتم الحفاظ على تعدد القدرات؟)


ورقة أخرى من مجموعة Yamanaka تشرح Fbx15.

انها تقول:

أدى تعطيل Oct3 / 4 في الخلايا الجذعية الجنينية إلى انقراض سريع لتعبير Fbx15.

كانت الخلايا الجذعية الجنينية الخالية من Fbx15 طبيعية في التشكل والتكاثر والتمايز. توضح هذه البيانات أن Fbx15 هو هدف جديد في 3/4 أكتوبر ولكنه يمكن الاستغناء عنه للتجديد الذاتي للخلايا الجذعية الجنينية وتطويرها وخصوبتها.

لذلك لن يتم التعبير عن Fbx15 بتنسيق أكتوبر الخلايا.

لم أر أي ورقة تصف وظيفة هذا الجين ، لكن في حالة إدخال الكاسيت ، سيكون الموضع مفيدًا في التعبير عن الإدخالات على وجه التحديد في أكتوبر 3 / 4⁺ الخلايا


احصل على حق الوصول الكامل إلى دفتر اليومية لمدة عام واحد

جميع الأسعار أسعار صافي.
سيتم إضافة ضريبة القيمة المضافة في وقت لاحق عند الخروج.
سيتم الانتهاء من حساب الضريبة أثناء الخروج.

احصل على وصول محدود أو كامل للمقالات على ReadCube.

جميع الأسعار أسعار صافي.


خيارات الوصول

احصل على حق الوصول الكامل إلى دفتر اليومية لمدة عام واحد

جميع الأسعار أسعار صافي.
سيتم إضافة ضريبة القيمة المضافة في وقت لاحق عند الخروج.
سيتم الانتهاء من حساب الضريبة أثناء الخروج.

احصل على وصول محدود أو كامل للمقالات على ReadCube.

جميع الأسعار أسعار صافي.


إنتاج iPSCs

تُشتق الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات عادةً عن طريق تعداء جينات معينة مرتبطة بالخلايا الجذعية إلى خلايا غير متعددة القدرات ، مثل الأرومة الليفية البالغة. عادة ما يتم تحقيق تعداء من خلال ناقلات فيروسية ، مثل الفيروسات القهقرية. تشمل الجينات المصابة بالعدوى منظمات النسخ الرئيسية Oct-3/4 (Pouf51) و Sox2 ، على الرغم من أنه يُقترح أن الجينات الأخرى عززت كفاءة الحث. بعد 3-4 أسابيع ، تبدأ أعداد صغيرة من الخلايا المنقولة بالتشكل شكليًا وكيميائيًا حيويًا متشابهة مع الخلايا الجذعية متعددة القدرات ، وعادة ما تكون من خلال الانتقاء المورفولوجي ، أو مضاعفة الوقت ، أو من خلال الجين المراسل واختيار المضادات الحيوية.


دور Fbx15 في الخلايا الجذعية الجنينية واستخدامه في فحص خلايا iPS (ورق Yamanaka وغيره)؟ - مادة الاحياء

التضفير البديل (AS) هو عملية أساسية تكمن وراء توسع التنوع البروتيني وتنظيم التعبير الجيني. هنا ، نحدد حدثًا خاصًا بالخلايا الجذعية الجنينية المحفوظة تطوريًا (ESC) والذي يغير تفضيل ربط الحمض النووي لعامل نسخ عائلة forkhead FOXP1. نوضح أن الشكل الإسوي الخاص بـ ESC لـ FOXP1 يحفز التعبير عن جينات عامل النسخ المطلوبة لتعدد القدرات ، بما في ذلك أكتوبر 4, نانوغ, NR5A2، و GDF3، بينما يتم في نفس الوقت قمع الجينات المطلوبة للتمايز ESC. يعزز هذا الشكل الإسوي أيضًا الحفاظ على تعدد القدرات ESC ويساهم في إعادة البرمجة الفعالة للخلايا الجسدية إلى خلايا جذعية مستحثة متعددة القدرات. تكشف هذه النتائج عن دور محوري لحدث AS في تنظيم تعدد القدرات من خلال التحكم في برامج النسخ الخاصة بـ ESC.

ملخص رسومي

يسلط الضوء

► مفتاح الربط الخاص بـ ESC في نصوص FOXP1 ينتج الشكل الإسوي FOXP1-ES FOXP1-ES له خصائص ربط DNA مميزة مقارنة بالشكل الإسوي FOXP1 الكنسي يحفز FOXP1-ES جينات تعدد القدرات الرئيسية ويقمع العديد من جينات التمايز ► FOXP1-ES هو مطلوب من أجل ESC متعدد القدرات ولإعادة برمجة iPSC الفعالة


شكر وتقدير

نود أن نشكر جميع أعضاء المختبر والمتعاونين لدينا ، بما في ذلك فرق J.M Campistol و P. Guillen و E. Martinez و P. Ross على تعليقاتهم وعملهم المتفاني الذي ساهم بشكل كبير في الأفكار المقدمة هنا. تم دعم H.N. من قبل معهد كاليفورنيا للطب التجديدي (CIRM) ، والوكالة اليابانية للأبحاث الطبية والتطوير (AMED) و Takeda Pharmaceuticals International ، Inc. J.C.I.B. بدعم من مؤسسة G. Harold and Leila Y. Mathers الخيرية ومؤسسة Moxie و Fundación Dr. Pedro Guillen و UCAM. ج. كان مدعومًا بمنح من المعاهد الوطنية للصحة (HD 045022 ، R37-CA084198 ، 1R01NS088538-01).


آليات الحفاظ على التجديد الذاتي

من أجل الحفاظ على التجديد الذاتي المستقر للخلايا الجذعية الجنينية ، يجب أن تنتقل الآليات التي تمنع تمايزها وتعزز تكاثرها إلى الخلايا الوليدة. وبالتالي ، يجب الحفاظ على مستويات التعبير عن الجينات التي تشارك في هذه الآليات بشكل ثابت.

تعد شبكة عامل النسخ المستقرة من خلال التنظيم الإيجابي والسلبي بين مكوناتها آلية جيدة للحفاظ على أنماط التعبير الجيني المستقرة التي تحدد النمط الظاهري لخلية معينة (von Dassow et al. ، 2000). علاوة على ذلك ، يتيح لنا تطبيق وجهات النظر البيولوجية للأنظمة ، مثل نماذج الشبكة المنطقية ، شرح كيف يمكن للتغييرات الصغيرة في بعض مكونات الشبكة أن تؤدي إلى الانتقال الديناميكي لشبكة عامل النسخ من حالة إلى أخرى (Kauffman ، 2004) . نماذج الشبكة المنطقية العشوائية هي طريقة لنمذجة الشبكات التي تتكون من عوامل متعددة لها مدخلات متعددة في أنظمة معقدة. وهي تستند إلى المنطق المنطقي ، حيث يتم توحيد العديد من العوامل المنطقية ، مثل AND و OR ، في تعبيرات حول العامل بقيم ثنائية مثل 1 و 0 (Kauffman ، 2004).

يحتل Sox2 موقعًا مهمًا في صيانة شبكة عامل النسخ متعدد القدرات (الشكل 4 ب). كما نوقش أعلاه ، من المعروف أن Sox2 يتعاون مع Oct3 / 4 في تنشيط الجينات المستهدفة Oct3 / 4 (Yuan et al. ، 1995). حتى الآن ، تم تحديد المعززات الخاصة بـ ES والتي تحتوي على مواقع ربط لـ Oct3 / 4 و Sox2 في العديد من الجينات ، بما في ذلك Fgf4 (Yuan et al. ، 1995) ، osteopontin (Spp1 - Mouse Genome Informatics) (Botquin وآخرون ، 1998) ، UTF1 (نيشيموتو وآخرون ، 1999) ، اف بي اكس او 15(توكوزاوا وآخرون ، 2003) ، نانوج (كورودا وآخرون ، 2005 روددا وآخرون ، 2005) و أعسر 1(ناكاتاكي وآخرون ، 2006). ومن المثير للاهتمام ، كلاهما أكتوبر 3/4 و Sox2 تمتلك معززات يتم تنشيطها بواسطة مجمع Oct3 / 4-Sox2 بطريقة خاصة بالخلايا الجذعية (Chew et al. ، 2005 Okumura-Nakanishi et al. ، 2005 Tomioka et al. ، 2002). Sox2- تموت الأجنة الفارغة فور انغراسها (Avilion et al.، 2003) Sox2 في خلايا الفئران الجذعية الجنينية يحث على التمايز إلى سلالات متعددة ، بما في ذلك الأديم الظاهر ، مما يشير إلى أهميتها الوظيفية في الحفاظ على تعدد القدرات (إيفانوفا وآخرون ، 2006). جيل Sox2- ستساعد الخلايا الجذعية الجنينية الكاملة في توضيح الوظيفة الدقيقة لـ Sox2 وتحديد الجينات المستهدفة ، كما سيكون الحال أيضًا في 3/4 أكتوبر.

تحديد المواقع المستهدفة المشتركة في العناصر التنظيمية ل أكتوبر 3/4 ، Sox2 و نانوج من خلال الدراسات الحديثة التي تستخدم الترسيب المناعي للكروماتين (ChIP) جنبًا إلى جنب مع تقنيات الموقع على نطاق الجينوم ، اقترحت أن أكتوبر 3/4 ، Sox2 و نانوج قد تشكل دائرة تغذية مرتدة تنظيمية تحافظ على تعدد القدرات في الخلايا الجذعية الجنينية البشرية والفأرية في هذه الدائرة ، وجميع عوامل النسخ الثلاثة تنظم نفسها ، وكذلك بعضها البعض (Boyer et al. ، 2005 Loh et al. ، 2006). على الرغم من عدم تأكيد نموذج التغذية الراجعة هذا في الخلايا الجذعية الجنينية ، فإن حلقة التغذية الراجعة الإيجابية وحدها لن تكون قادرة على السماح لشبكة عامل النسخ بالحفاظ على تعدد القدرات لأن تعدد القدرات حساس للغاية لمستويات التعبير عن أكتوبر 3/4(نيوا وآخرون ، 2000).

نظرًا لأن جرعة زائدة طفيفة من Oct3 / 4 تؤدي إلى التمايز ، فإن الشبكة تتطلب حلقة ردود فعل سلبية من أجل التنظيم بإحكام أكتوبر 3/4 مستويات التعبير. أظهر نموذج تجريبي في الخلايا بدائية النواة أن حلقة ردود فعل سلبية بسيطة يمكن أن تثبت بشكل كبير مستوى تعبير الجين (Becskei and Serrano ، 2000). لذلك ، يمكن أن تكون حلقة التغذية الراجعة السلبية المباشرة أو غير المباشرة كافية لتنظيم التعبير الكمي عن أكتوبر 3/4 ضمن النطاق المطلوب للحفاظ على تعدد القدرات. حتى الآن ، تم تحديد عنصرين تنظيميين ، محسن بعيد وقريب ، على أنهما معززات خاصة بالخلايا الجذعية أكتوبر 3/4(Yeom et al.، 1996) ، حيث يتم تجنيد العديد من المنظمين الموجبين والسلبيين (الشكل 4 أ). من بينها ، من المعروف أن أفراد عائلة المستقبلات النووية اليتيمة ، والتي يمكن أن ترتبط بالمُحسِّن القريب ، تؤثر على تعبير Oct3 / 4. متماثل مستقبلات الكبد 1 (Lrh1 ، المعروف أيضًا باسم Nr5a2) هو منظم إيجابي مفترض لـ أكتوبر 3/4، كما أكتوبر 3/4 التعبير مفقود في الأديم الخارجي لـ Lrh1- أجنة خاملة ويتم تنظيمها بسرعة بعد تحريض التمايز في Lrh1- الخلايا الجذعية الجنينية الكاملة (Gu et al. ، 2005a). على النقيض من ذلك ، فإن العامل النووي للخلايا الجرثومية (Gcnf ، أو Nr6a1) هو احتمال أكتوبر 3/4 منظم سلبي ، كمجال تعبير أكتوبر 3/4 يتضخم ويمتد تعبيره في الظهارة العصبية لـ جكنف- أجنة خاملة (Fuhrmann et al. ، 2001). أكتوبر 3/4 القمع بعد تحريض التفاضل يتأخر أيضًا في جكنف- الخلايا الجذعية الجنينية الكاملة (Gu et al. ، 2005b). عوامل النسخ المعزز لألبومين الدجاج (Coup-tf) الأول والثاني ، المشفرة بواسطة Nr2f1 و Nr2f2، على التوالي ، تعمل أيضًا كمنظمين سلبيين لـ أكتوبر 3/4التعبير (بن شوشان وآخرون ، 1995). التوازن بين هذه الهيئات التنظيمية الإيجابية والسلبية قد يحدد المستوى الدقيق لـ أكتوبر 3/4 التعبير ردا على المحفزات خارج الخلية (الشكل 4 أ).

شبكة عامل نسخ للتحكم في التجديد الذاتي للخلايا الجذعية وتمايزها. (أ) تنظيم نسخ الماوس أكتوبر 3/4 الجين. هناك أربع مناطق محمية تطوريًا (CR1-4) تحتوي على مواقع ربط متعددة لعامل النسخ (TF). يتم عرض TFs التي ترتبط بهذه المواقع أعلاه وتقوم إما بتنشيط النسخ (الأحمر) أو قمع النسخ (الأزرق). DE ، محسن بعيد PE ، محسن قريب PP ، مروج قريب. (ب) شبكات عامل النسخ للخلايا الجذعية متعددة القدرات (خضراء) ، والأديم الباطن (أصفر) والأديم الباطن البدائي (خارج الغشاء) (أزرق). تحافظ حلقات ردود الفعل الإيجابية بين أكتوبر 3/4 و Sox2 و Nanog على تعبيرها لتعزيز التجديد الذاتي المستمر للخلايا الجذعية الجنينية. يتم تنظيم Cdx2 تلقائيًا ويشكل حلقة مثبطة متبادلة مع Oct3 / 4 ، والتي تعمل على إنشاء أنماط التعبير الحصرية للطرفين. قد توجد حلقة تنظيمية مماثلة ، لم يتم تأكيدها بعد ، بالنسبة إلى Nanog و Gata6. مزيج من حلقات التغذية الراجعة الإيجابية والحلقات المثبطة المتبادلة يحول معلمات الإدخال المستمرة إلى توزيع احتمالي ثنائي النسبي ، مما يؤدي إلى فصل واضح بين سلالات الخلايا هذه (انظر النص للحصول على التفاصيل). يعمل Coup-tfs و Gcnf كنظام ردود فعل سلبية لقمع Oct3 / 4 تمامًا.

شبكة عامل نسخ للتحكم في التجديد الذاتي للخلايا الجذعية وتمايزها. (أ) تنظيم نسخ الماوس أكتوبر 3/4 الجين. هناك أربع مناطق محمية تطوريًا (CR1-4) تحتوي على مواقع ربط متعددة لعامل النسخ (TF). يتم عرض TFs التي ترتبط بهذه المواقع أعلاه وتقوم إما بتنشيط النسخ (الأحمر) أو قمع النسخ (الأزرق). DE ، محسن بعيد PE ، محسن قريب PP ، مروج قريب. (ب) شبكات عامل النسخ للخلايا الجذعية متعددة القدرات (الخضراء) ، والأديم الباطن (الأصفر) والأديم الباطن البدائي (فوق الغشاء) (الأزرق). تحافظ حلقات ردود الفعل الإيجابية بين أكتوبر 3/4 و Sox2 و Nanog على تعبيرها لتعزيز التجديد الذاتي المستمر للخلايا الجذعية الجنينية. يتم تنظيم Cdx2 تلقائيًا ويشكل حلقة مثبطة متبادلة مع Oct3 / 4 ، والتي تعمل على إنشاء أنماط التعبير الحصرية للطرفين. قد توجد حلقة تنظيمية مماثلة ، لم يتم تأكيدها بعد ، بالنسبة إلى Nanog و Gata6. مزيج من حلقات التغذية الراجعة الإيجابية والحلقات المثبطة المتبادلة يحول معلمات الإدخال المستمرة إلى توزيع احتمالي ثنائي النسبي ، مما يؤدي إلى فصل واضح بين سلالات الخلايا هذه (انظر النص للحصول على التفاصيل). يعمل Coup-tfs و Gcnf كنظام ردود فعل سلبية لقمع Oct3 / 4 تمامًا.


الملخص

إن إنتاج الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات من الخلايا الجسدية البالغة عن طريق التعبير خارج الرحم لعوامل النسخ الرئيسية يحمل وعدًا طبيًا كبيرًا. ومع ذلك ، فإن التقنيات الحالية لتحفيز تعدد القدرات تعتمد على العدوى الفيروسية ، وبالتالي فهي ليست قابلة للتطبيق في الوقت الحاضر ضمن بيئة سريرية. وبالتالي ، هناك حاجة الآن إلى فهم أفضل للأساس الجزيئي لتعدد القدرات للخلايا الجذعية ومواصفات النسب من أجل استكشاف طرق بديلة للحث على تعدد القدرات للتطبيق السريري. ومع ذلك ، فإن تعقيد الدوائر الجزيئية الأساسية يجعل هذه المهمة صعبة من الناحية المفاهيمية. من أجل معالجة هذه المشكلات ، درسنا نموذجًا حسابيًا للتحكم النسخي لمواصفات مصير الخلية. يشتمل النموذج على دائرتين فرعيتين متفاعلتين بشكل متبادل: دائرة مركزية متعددة القدرات تتكون من تفاعلات بين عوامل النسخ الخاصة بالخلايا الجذعية أكتوبر 4, SOX2 و نانوغ مقترنة بدائرة تمايز تتكون من تفاعلات بين الجينات الرئيسية التي تحدد النسب.

تؤدي المفاتيح الجزيئية التي تنشأ من حلقات التغذية الراجعة داخل هذه الدوائر إلى ظهور تسلسل محدد جيدًا لقيود الجينات المتعاقبة المقابلة لسلسلة تمايز محكومة استجابة للمحفزات البيئية. علاوة على ذلك ، وجدنا أن تسلسل التمايز هذا أحادي الاتجاه بقوة: بمجرد إسكاته ، لا يمكن إعادة تنشيط عوامل النسخ الأساسية بسهولة. في سياق تعدد القدرات المستحث ، يشير هذا إلى أن الخلايا المتمايزة تقاوم بشدة إعادة البرمجة إلى حالة أكثر بدائية. ومع ذلك ، يشير نموذجنا إلى أنه في ظل ظروف معينة ، قد يكون تضخيم التقلبات منخفضة المستوى في حالة النسخ ("ضوضاء" النسخ) كافياً لتحفيز إعادة تنشيط مفتاح تعدد القدرات الأساسي وإعادة البرمجة إلى حالة متعددة القدرات. يقدم هذا التفسير شرحًا لعدد من الملاحظات التجريبية المتعلقة بالآليات الجزيئية لإعادة البرمجة الخلوية بواسطة عوامل محددة ويقترح دورًا للعشوائية في إعادة برمجة الخلايا الجسدية إلى تعدد القدرات.

الاقتباس: MacArthur BD، Please CP، Oreffo ROC (2008) Stochasticity والآليات الجزيئية للقدرة المستحثة. بلوس واحد 3 (8): e3086. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0003086

محرر: نيك مونك ، جامعة نوتنغهام ، المملكة المتحدة

تم الاستلام: 13 مايو 2008 وافقت: 7 أغسطس 2008 نشرت: 28 أغسطس 2008

حقوق النشر: © 2008 ماك آرثر وآخرون. هذا مقال مفتوح الوصول يتم توزيعه بموجب شروط ترخيص Creative Commons Attribution License ، والذي يسمح بالاستخدام غير المقيد والتوزيع والاستنساخ بأي وسيلة ، بشرط ذكر المؤلف الأصلي والمصدر.

التمويل: تم تمويل هذا العمل من خلال منحة EPSRC رقم EP / C003497 / 1.

تضارب المصالح: وقد أعلن الباحثون إلى أن لا المصالح المتنافسة موجودة.


الاستنتاجات

يعد مجال الخلايا الجذعية تحديًا متعدد الطبقات ومتعدد التخصصات ، وقد أدى الجمع بين طرق إزالة الأنسجة وتقنيات التصوير ثلاثي الأبعاد إلى توسيع العمل السابق استنادًا إلى تقنيات التصوير التقليدية ثنائية الأبعاد ، ومهد الطريق نحو دراسة منهجية لأنظمة الخلايا الجذعية والأمراض التي تكمن وراءها هو - هي. الأساليب الحديثة لتطهير الأنسجة لديها القدرة على إجراء العديد من الدراسات وهي الاتجاه الصحيح للتطوير في طرق المقاصة. علاوة على ذلك ، يمكن تطبيق هذه الطرق جنبًا إلى جنب مع طرق الفحص المجهري الجديدة مثل LSFM و OpenSPIM مع برنامج تحليل الصور على العديد من الدراسات خاصةً دراسات الخلايا الجذعية ، مثل تتبع الخلايا الجذعية للطب التجديدي. يمكن أن يستغل الاتجاه المستقبلي نحو مزيج من كل من طرق إزالة الأنسجة والتصوير ثلاثي الأبعاد التطبيق العملي لأنظمة الخلايا الجذعية في علم وظائف الأعضاء والمرض. نأمل أن يوفر فهم التفاعلات الخلوية والتوصيف المنهجي لأنظمة الخلايا الجذعية إرشادات لتطوير استراتيجيات علاجية جديدة للعلاجات المعدلة للأمراض وتجديد عيوب الأنسجة.


الفصل 10 - الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات مقابل الخلايا الجذعية الجنينية: نظرة عامة شاملة على الاختلافات وأوجه التشابه

بالنظر إلى إمكانات التمايز ، فإن الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات (بما في ذلك الخلايا الجذعية الجنينية ، والخلايا الجذعية الجنينية ، والخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات ، iPSCs) تمثل أداة قوية لمجموعة واسعة من التطبيقات الطبية الحيوية والسريرية مثل نموذج المرض ، وفحص الأدوية ، والعلاج الخلوي ، و الطب التجديدي.

من وجهة النظر المورفولوجية والوظيفية ، فإن ESCs و iPSCs متشابهة جدًا ، ولكن لا يمكن إثبات تكافؤهما الحقيقي عن طريق الاختبارات الوظيفية الكلاسيكية مثل التكملة الرباعية الصبغية بسبب الحدود الأخلاقية. لذلك ، منذ اكتشافهم لـ iPSCs في عام 2006 ، قامت العديد من المجموعات بالتحقيق في الملامح الترانسكريبتومية ، والجينية ، والبروتينية ، والأيضية لكل من ESCs و iPSCs لتشريح أوجه التشابه والاختلاف بينهما ولتحديد ، إن وجد ، توقيع جزيئي محدد لكل جذع متعدد القدرات خط الخلية. هنا ، نقوم بالإبلاغ عن بعض الدراسات الأكثر صلة وتلخيصها بناءً على المقارنة الجزيئية لـ ESCs و iPSCs. بشكل جماعي ، تُظهر هذه الدراسات المقارنة أنه على الرغم من أن iPSCs تشبه إلى حد كبير ESCs ، إلا أنها لا تزال تتميز ببعض التوقيعات الجزيئية المحددة التي تحتاج إلى مزيد من التحقيق لتحسين استخدام iPSCs في الأبحاث الأساسية والبيئات السريرية.